เซลล์ อธิบายและทำความเข้าใจเกี่ยวกับการประเมินความเป็นพิษของเซลล์

เซลล์ ปรากฏการณ์คลาสสิกของความเป็นพิษต่อเซลล์ คือความสามารถของทีลิมโฟไซต์ ในการจดจำองค์ประกอบของเซลล์ ที่มีสัญญาณของความผิดปกติทางพันธุกรรม โดยเฉพาะเซลล์ที่ดัดแปลงโดยไวรัส เซลล์เนื้องอก สารก่อภูมิแพ้และสารก่อมะเร็งและทำลายพวกมัน เซลล์ NK ซึ่งแตกต่างจากทีลิมโฟไซต์ เป็นที่รู้จักในฐานะเซลล์แปลกปลอมของร่างกาย ที่สูญเสียแอนติเจนของสารเชิงซ้อน ที่มีความเข้ากันได้ดีที่สำคัญโมเลกุล MHC

เซลล์อื่นๆเช่นบีลิมโฟไซต์ เซลล์โมโนไซต์มาโครฟาจ อีโอซิโนฟิล นิวโทรฟิลก็มีความเป็นพิษต่อเซลล์เช่นกัน แต่หน้าที่นี้เกี่ยวข้องกับการมีส่วนร่วม ของแอนติบอดีต่อเซลล์เป้าหมาย CM ความเป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์ที่ขึ้นกับแอนติบอดี ไซโตไคน์ TNFa และสารอื่นๆภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยา เซลล์หลักที่มีความเป็นพิษต่อเซลล์ คือเซลล์ลิมโฟไซต์ที่เป็นพิษต่อเซลล์เฉพาะของแอนติเจน CTL,NK เช่นเดียวกับเซลล์มัยอีลอยด์ มาโครฟาจ นิวโทรฟิล

กิจกรรมที่เป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์นักฆ่า เกิดขึ้นจากการสัมผัสไซแนปติกโดยตรงของลิมโฟไซต์ เซลล์เอฟเฟคเตอร์-EC กับ BM ในเวลาเดียวกันการเกิดอะพอพโทซิสใน CM ในเซลล์ลิมโฟไซต์ที่เป็นพิษต่อเซลล์ที่เจริญเต็มที่ แกรนูลที่มีเพอร์ฟอรินและแกรนไซม์จะก่อตัวขึ้น

หลังจากการก่อตัวของไซแนปส์ระหว่าง EC และ CM เม็ดจะถูกทำให้เข้มข้น ในบริเวณที่สัมผัสแล้วปล่อยไปทาง CM เพอร์ฟอร์ริน เมื่อสัมผัสกับเมมเบรน KM จะเกิดโพลิเมอไรซ์รวมเข้ากับเมมเบรน ทำให้เกิดรูพรุนในนั้นซึ่งมีเส้นผ่านศูนย์กลางประมาณ 100 แกรนไซม์

การแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของโมเลกุล Fas CD95 บนลิมโฟไซต์ที่ถูกกระตุ้นแสดงให้เห็นถึง ความสามารถในการตายของเซลล์ ในกรณีของกระบวนการทางสรีรวิทยาที่ล้มเหลว ของการเพิ่มจำนวนและการสร้างความแตกต่าง หลังการกระตุ้นเป็นที่เชื่อกันว่ากระบวนการดังกล่าว สามารถนำไปสู่ปรากฏการณ์ ที่กำหนดว่าเป็นภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง ซึ่งเกิดจากการกระตุ้น ในระบบหลอดทดลองระดับของการทำลาย CM

ซึ่งจะเข้าใกล้การสลาย มีหลายวิธีในการประเมินกิจกรรมการทำงานของ CTL แต่มาตรฐานทองคำยังถือเป็นการทดสอบโครเมียม โดยโครเมียมหมายถึงเกลือของโซเดียมโครเมต ที่มีไอโซโทปกัมมันตภาพรังสีของโครเมียม Na 2 51 CrO 4 ซึ่งใช้สำหรับการติดฉลาก KM ฉลากดังกล่าวได้รับการคัดเลือก โดยสังเกตจากประสบการณ์ว่าค่อนข้างเป็นไปตามเกณฑ์ต่อไปนี้ แทรกซึมเข้าไปในเซลล์ที่มีชีวิตอย่างอิสระ และไม่ปล่อยทิ้งไว้ในขณะที่เซลล์ยังมีชีวิตอยู่

ฉลากไม่ยึดติดกับโครงสร้างภายในเซลล์อย่างแน่นหนา และมีความสามารถในการเข้าสู่สภาพแวดล้อมภายนอกเซลล์จาก CM ที่กำลังจะตาย ทางเลือกของ CM เป็นงานสร้างสรรค์ที่แยกจากกัน ซึ่งได้รับการแก้ไขโดยการทดลองตามเป้าหมายของการศึกษาเฉพาะ ส่วนใหญ่มักใช้เนื้องอกหรือเซลล์ที่ติดไวรัสเป็น CM เมื่อเลือก CM แล้วการออกแบบการทดลองเพิ่มเติมจะเป็นดังนี้ CM จะถูกนับและจ่ายในปริมาณที่ถูกต้องลงในหลุม

เป็นเวลา 4 ถึง 6 ชั่วโมงเมื่อสิ้นสุดการเพาะเลี้ยงเพลตจะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 250 กรัม เป็นเวลา 5 นาที เพื่อให้เซลล์อัดแน่น สารเหนือตะกอนจะถูกเก็บรวบรวมในหลอดพิเศษ ซึ่งกัมมันตภาพรังสีถูกนับในเคาน์เตอร์ γ เป็นการใช้การควบคุม

หลุมที่มี CM ซึ่งไม่ได้แนะนำ CE คือการควบคุมการปล่อยฉลากที่เกิดขึ้นเอง หลุมที่มี CM ซึ่งเพิ่มไทรทัน X-100 1 เปอร์เซ็นต์ v/v แทน CE ซึ่งเป็นการควบคุมการปล่อยฉลากจาก CM สูงสุดที่เป็นไปได้

ความเป็นพิษต่อเซลล์ในหลุมทดสอบมักจะคำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้ การประเมินกิจกรรมที่เป็นพิษต่อเซลล์ โดยใช้โฟลว์ไซโตเมทรี นอกเหนือจากการทดสอบโครเมียมที่อธิบายไว้แล้ว ซึ่งยังมีวิธีการประเมินความเป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์

โดยใช้โฟลว์ไซโตมิเตอร์ในกรณีนี้รีเอเจนต์สองตัวถูกใช้เพื่อติดฉลากเซลล์ อย่างแรก CM จะติดป้ายกำกับด้วยฟลูออโรโครม ซึ่งจะแทรกซึมเข้าไปในเซลล์โดยไม่ทำลายเซลล์ดังกล่าว และจะเรืองแสงเมื่อถูกกระตุ้นด้วยรังสีเลเซอร์ จากนั้น EC จะถูกเพิ่มเข้าไปใน CM พวกมันจะถูกฟักเข้าด้วยกัน เพื่อให้เกิดการจู่โจมของฆาตกร และรีเอเจนต์ที่สองจะถูกเติมลงในส่วนผสม ถูกแปลงเป็นฟลูออโรโครมเฉพาะในเซลล์ที่มีชีวิต ภายใต้การกระทำของเอนไซม์เอสเทอเรสของพวกมัน

ด้วยเหตุนี้ในภาพสุดท้าย EC จะเรืองแสงด้วยฟลูออโรโครมแบบสด สีเดียว CM แบบสดจะเป็นแบบสองสี CM ที่ตายแล้วจะเป็นสีเดียวตามฟลูออโรโครมแรก วิธีการที่เป็นที่รู้จักสำหรับการประเมินความเป็นพิษต่อเซลล์ ของเซลล์ที่ขึ้นกับแอนติบอดีโดยใช้เม็ดเลือดแดง

เช่น แกะ ที่เคลือบด้วย IgG แอนติบอดีต่อพวกมันเป็น KM EC ที่พาตัวรับ Fc ไปที่ IgG ทำลาย CM กิจกรรมของนักฆ่าดังกล่าว NK บีเซลล์ โมโนไซต์ มาโครฟาจ โดยระดับของเฮโมโกลบินที่ปล่อยออกมา

อ่านต่อได้ที่ : น้ำ อธิบายเกี่ยวกับลักษณะเฉพาะของกลไกการเกิดความกระหาย